خالص سازی و مطالعه آنزيم پلی گالاکتوروناز جدايه با بيماريزايی زياد (F23)از قارچ oxysporumFusariumعامل بيماری بوته زردی در  نخود

چكيده:

قارچ Fusarium oxysporum بعنوان يكي از عوامل مهم بيماريزا در نخود زراعي محسوب مي‌شود و بيماري بوته زردي را در  نخود ايجاد مي‌كند و خسارات زيادي را به اين محصول وارد مي سازد . يكي از علتهاي مهم بيماريزايي قارچ ها آنزيمهای پكتيكي از جمله آنزيم پلي‎گالاكتوروناز است كه جزء آنزيمهاي خارج سلولي محسوب شده و با تجزيه تركيبات پكتيني ديوارة سلولي سلولهاي گياهي اولين مراحل آلودگي را فراهم مي سازد.

 جهت تخليص آنزيم پلي‎گالاكتوروناز (EC 3.2.1.15) از جدايه (isolated)  F23(جدايه اي با شدت بيماريزايي زياد) از تكنيك كروماتوگرافي تبادل يوني ،و نوع كاتيوني آن بر روي بستر CM-Sepharose Fast Flow با  PH  معادل 5/5  استفاده گرديد. جهت جدا سازي پروتئينهاي متصل به ستون از شيب نمك سديم كلرايد يك مولار استفاده شد‏‏‏‎‎‎. نتايج نشان داد در ناحيه غلظت نمكي بين 45/0 – 25/0 ميلي مولار, يك قله با فعاليت آنزيمي وجود دارد‏‏‏‏‎‎‎.

پوسیدگی خاکستری پیاز Onion Gray blight

عامل این بیماری سه گونه قارچ می‌باشد که تولید Blight می‌کند :

Botrytis squamosa

B. cinerae

B.allii
پوسیدگی عمیق قهوه‌ای با کپک خاکستری روی آن و اسکلرتهای سیاه از علائم پوسیدگی گردن پیاز است .

در ایران مهمترین عامل پوسیدگی پیاز B.allii می‌باشد .

گونه B.squamosa تولید سوختگی بسیار شدید در برگ می‌کند و گیاه را از بین می‌برد. اما در گونه B.cinerae تنها نقاط زیر قهوه‌ای روی برگ ایجاد می‌شود B.allii عمدتاً به غده حمله می‌کند و به عنوان پاتوژن برگی زیاد مطرح نیست ، اما گاهی به برگهای زخمی حمله کرده و موجب تولید لکه های ریز می شود که بسیار کم این وضع اتفاق می‌افتد. در اغلب موارد اسپور این قارچ اگر روی برگ سالم قرار گیرد جوانه زده و موجب زردی خفیفی در برگ می‌کند.

ريخت شناسي و تشريع

ماده : ماده هاي rostochiensis Globodera كيسه هایي تشكيل مي دهند ، كه بدنهاي نماتدهاي ماده مرده است كه از تخمها حفاظت مي كند . بدن گرد ، كروي با گردني كوتاه و بدون مخروط انتهايي .

كيسه هاي جديد قهوه اي براق گرد شده و داراي گردني برجسته هستند. زائده سيخي عمودي كمي خميده و گره هاي آن گرد شده واز عقب داراي سرازير هستند .

تخمدانها دو عدد بزرگ هستند . پوست ضخيم ، با طرح سطحي تور مانند است ، لايه d وجود دارد . دستگاه تناسلي مادگي در انتها و بلندي متوسط دارد. روزنه مقعد وجود ندارد اما مقعد و مادگي هر دو در يك لگن مادگي قرار دارند .همه تخمها درون بدن نگهداري ميشوند . ( توده تخمي وجود ندارد ) .

توجه: Globodera.rostochiensis قبل از قطع پوسته ريشه از يك مرحله زرد عبور مي كند . تا زمان مرگ و تبديل به كيسه قهوه اي رنگ به صورت كرم سفيد شيري رنگ باقي مي ماند ماده هاي بالغ بزرگ سال روي ريشه سيب زميني از لحاظ رنگ، زرد طلائي هستند .

بیماریهای مهم برنج

بلاست برنج Rice blast
عامل بیماری قارچP.oryzae) Pyricularia grisea ) با فرم جنسی Magnaporthe grisea از گروه آسکومیست است. سال 637 درچین آنرا تب برنج Rice fever می نامیدند. در ژاپن از حدود سال 1700 بیماری را می شناختند. در قرن نوزده عامل بیماری شناسایی و نامگذاری شد. فرم غیرجنسی قارچ خیلی مهم است. فرم جنسی قارچ توسط ژاپنی ها در شرایط آزمایشگاه تشکیل و شناسایی شده است. قارچ تولید کنیدیوفورهایی میکند که مرتب رشد کرده و دوباره کنیدیوم میدهد. کنیدیوم سه سلولی است و به رنگ سبز زیتونی می باشد. زیرا کنیدیوم یک زائده کوچک دارد. معمولاً سلولهای پایینی و بالایی کنیدیوم جوانه می زنند. شکل جنسی قارچ تولید پریتسیوم می کند. آسکوسپورها هم معمولاً 3 یا 4 سلولی هستند. قارچ هتروتالیک است. در طبیعت، فرم جنسی احتمالاً خیلی کم تشکیل میشود و مهم نیست.

در ایران این قارچ را قبلاً از شمال گزارش دادند و امروزه از شمال، اصفهان، غرب کشور، آذربایجان، خوزستان و فارس گزارش می شود.

بيماري سياهك سخت (پوشيده) Ustilago hordei، تنها در جو و يولاف باعث كاهش شديد محصول مي‌شود. قارچهاي مولد بيماري سياهك سخت در جو و يولاف، از نظر خصوصيات مرفولوژيك مشابهند؛ اما از نظر ايجاد بيماري در يولاف و جو با يكديگر تفاوت دارند؛ يعني يك نوع تنها جو را و نوع ديگر تنها يولاف را آلوده مي كند.

1. کاربوکسین تیرام wp 75% یک تادو  در هزار ضد عفونی بذر

2. مانکوزب wp 80% یک تا دو در هزار ضد عفونی بذر قبل از کشت.

 تهیه و تایپ از کشاورز تنها(از روی جزوه بیماری های مهم گیاهان زراعی دکتر بهرام شریف نبی از دانشگاه اصفهان.برای خرید جزوه می توانید به فروشگاه کشاورز تنها مراجعه کنید.).

www.Alonefarmer.blogfa.com  1386/11/27

بیماری ویروسی ذرت  Maize viruses:

ویروس موزائیک کوتولگی ذرت Maize dwarf mosaic viruse

از بیماری های مهم ویروسی ذرت است که از عوامل محدود کننده کشت ذرت در آمریکا بوده و روی آن نیز بسیار کار شده است و گسترده ترین ویروس در ذرت است.در ایران دلیل قاطعی دلال بر وجود آن نیست ولی به احتمال قوی ویروسی شبیه به آن در ایران وجود دارد.

علائم بیماری: گیاهان آلوده حالت موزائیک همراه با کوتولگی و کاهش رشد خفیف از خود نشان می دهند.در برگهای ذرت موزائیک در قاعده برگ  بصورت لکه ای روشن در ابتدا بوجود می  آید وبعدا در حین رشد برگ بصورت نوارهای زرد امتداد می یاید.

لکه قهوه ای برگ ذرت در اثر Bipolaris zeicola:

در مناطق ذرت کاری گیلان و مازندران دیده شده است.علائم به صورت لکه های بیضوی تا مدور کاهی تا خرمائی روی برگها و به اندازه 2/5-1/5 سانتیمتر هستند.

پوسيدگي باكتريايي ريشه Pectobacterium cartovorum سفيدك داخلي Peronospora farinose سفيدك سطحي Erysiphe polygonnni , Erysiphe betae زنگ Uromyces betae لكه گرد برگ چغندر Cercospora beticola پوسيدگي بنفش ريشه چغندر Helicobasidium purpureum پوسيدگي ريشه چغندر Rhizoctonia solani , Aphanomyces levis , Sclerotium rolfsii پوسيدگي مركزي ذر اثر قارچ Phoma betae , Pleospora bjorlingii پيچيدگي و تورم رگبرگ ها Beet Curly Top Virus موزائيك چغندر Beet Mosaic Virus زردي چغندر Beet Yellow Virus , Beet Mild Yellowing Virus نماتد مولد سيست Heterodera schachtii , Globodera rostochiersism ,H .gottiana , H . cruciferae , H . trifolii , H . carotae , H . glycines

منبع مقاله گیاهپزشکان جوان    دانشجویان رشته مهندسی کشاورزی_ گیاهپزشکی.
دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات.

سفيدك حقيقي يكي از بيماريهاي مهم غلات در مناطق مرطوب است . عامل بيماري قارچ Erysiphe graminis (Blumeria graminis) است كه يك انگل اجباري است و روي جو بيشتر از سايرغلات خسارت وارد مي كند .

علائم بيماري بصورت لكه هاي سفيد رنگ است كه توسط توده ميسليومي سفيد مايل به خاكستري در سطح برگ و سنبله ها نيز آلوده شوند . اندامهاي باردهي قارچ به رنگ خاكستري مايل به زرد تا تيره در سطح ميسليومهاي پير تشكيل مي شود . در سطح زيرين برگ ؛ در محل آلودگي ، نقاط زرد ريز با بافت مرده ديده مي شود .

عامل بیماری قارچ p.helianth )   Plasmopra   halstedii )می باشد که ازگروه Oomycetes است. یکی از بیماری های مهم آفتاب گردان است که از کشورهای زیادی از جمله ایران گزارش شده است. حدود سال 1343 برای اولین بار در آذربایجان دیده وگزارش گردید. در آذربایجان،گیلان و کردستان بیماری مهمی است. درفارس هم دیده شده است. این بیماری بذرزاد است. خسارت این بیماری خیلی زیاد است زیرا ممکن است اصلاً بذر تشکیل نشود. ویا اینکه میزان روغن آن پایین بیا ید و گاهی اوقات تا 50%محصول راازبین ببرد. قارچ عامل بیماری روی جوانه زنی بذر هم اثر دارد،چراکه بذرها کوچک مانده وقدرت جوانه زنی آنها کاهش می یابد ویا اینکه تولید گیاهان غیرنرمال(کوتوله) می کند .                                   

 علائم بیماری:

علائم بیماری بصورت کوتولگی با لکه های کلروتیک در اطراف رگبرگها وایجاد حالت موزائیکی می باشد(شبیه علائم بیماری های ویروسی ). این علائم هم دربرگهای اولیه ودر برگهای بزرگتر دیده می شود.درزیر برگ پوشش کرکی دیده می شود که به شناسایی سفیدک کرکی کمک می کند.

گندم يكي از مهمترين محصولات در اقتصاد كشاورزي جهان است. يكي از موانع مؤثر در افزايش توليد گندم بيماري زنگ است. از ميان روشهاي مديريت بيماريهاي گياهي،‌اصلاح نبات براي مقاومت بر عليه بيماري يكي از مؤثرترين و اقتصادي ترين روش ها است. اگر ژنهاي مقاومت در ميان ارقام زراعي يافت نشوند،‌ ابتدا ضروري است كه اين ژنها را در ميان گونه هاي خويشاوند كه يك يا دو ژنوم از سه ژنوم گندم هگزاپلوئيد را دارند، جستجو نمود و درنهايت مي توان از گونه ها و جنسهاي غير خويشاوند به اين منظور استفاده كرد. در حال حاضر چندين روش براي انتقال مؤثر تنوع ژنتيكي به گندم موجود است. اين روشها عبارتند از : دو برابر كردن كروموزومها و توليد آمفي پلوئيد، تكنيك استفاده از گونه هائي به عنوان پل رابط (Bridge Technique) و توليد گندم هائي با يك كروموزوم خلرجي اضافي يا جايگزين شده addition lines) و (Substitution lines، نوتركيبي بين گونه اي، القاء جفت شدن كروموزومهاي همولوگ،‌ترانسلوكاسيون القاء شده توسط اشعه، ترانسلوكاسيون خود بخودي، كشت بافت دورگ حاصل از تلاقي هاي دور و استفاده از ژنهـــاي كشندة‌ گامت. در نتايــج تلاقي هاي دور گاهي مسائلي مانند عدم بروز ژن مقاومت منتقل شده و پيوستگي ژن با قطعه كرماتين ناخواسته اتفاق مي افتد كه بايد به دقت درنظر گرفته شوند.

در حال حاضر روش هائي مانند بررسي واكنش مقاومت ارقـــام، بررسي جفت شدن كروموزوم ها و كروموزوم باندينگ، ماركرهاي ايزوزايم In Situe Hybridization و ماركرهاي DNA مانند RFLP و SSR بطور گسترده اي براي رديابي و ارزيابي ژن مقاومت منتقل شده به گندم مورد استفاده مي باشند. در مواردي كه كروموزوم در برگيرندة ژن منتقل شده ناشناخته باشد مي توان از روش تجزيه مونوزومي استفاده نمود. براي شناسائي ژن مقاومت و تأييد اينكه اين ژن جديد است يا قبلاً معرفي شده مي توان از مقايسه تيپ آلودگي اين ژن با تيپ آلودگي لاينهاي ايزوژن كه داراي ژنهاي شناخته شدة‌ مقاومت به زنگ هستند با آلودگي توسط يك سري نژاد فيزيولوژيك زنگ استفاده نمود. لاين هاي ايزوژن براي ژنهاي مقاومت قبلاً معرفي شده كه همان الگوي مقاومت را در مقايسه با ژنهاي در دست معرفي نشان دادند براي تست آلل بودن استفاده خواهند شد.